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為什么pcr的時候，DNA模板濃度高了，會有拖尾？

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為什么pcr的時候，DNA模板濃度高了，會有拖尾？

2023-04-04 17:36

拖尾是在目的條帶上部，就是說堿基對多，如果我稀釋DNA模板，效果就會好的很吶！
2個回答
2023-04-04 22:21
產(chǎn)生的大量非特異擴(kuò)增的小片段
2023-04-04 21:48
DNA模板濃度高了，不僅會有拖尾，還可能會沒有PCR條帶。
特別是在DNA模板純度不純的時候，會對PCR起抑制作用。
PCR反應(yīng)中，模板只要1ng就可以，所以模板濃度不要太高。
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pcr反應(yīng)模板DNA濃度最低要求是多少？
3個回答2023-04-12 10:46
模板DNA濃度主要看你的PCR擴(kuò)增體系所使用的酶，一般普通的酶的話DN模板量在50到100ng都可以擴(kuò)增出來的，高效一點(diǎn)的酶的話幾ng也可以擴(kuò)增出來的。
模板的濃度對PCR有什么影響，一般要多大濃度？
2個回答2022-12-21 18:32
要看用的是什么模板了，pcr的靈敏度很高，幾pg的DNA就能檢測出來，一般用pcr產(chǎn)物或者質(zhì)粒做模板，只需要1ng左右就可以，如果是基因組或者cDNA做模板，模板量可適當(dāng)增加。 PCR指聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)...
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模板的濃度對PCR有什么影響，一般要多大濃度?
1個回答2022-12-19 00:20
那要看你用的是什么模板了。 pcr的靈敏度很高，幾pg的DNA就能檢測出來了。一般用pcr產(chǎn)物或者質(zhì)粒做模板，只需要1ng左右就可以了，如果是基因組或者cDNA做模板，模板量可適當(dāng)增加。
我想問PCR擴(kuò)增時使用的DNA模板濃度一般多大?加多少?
1個回答2022-12-19 00:20
我們一般不去特意檢測提取的得到的模板濃度,純度倒是要注意一下,紫外分光達(dá)到1.8即可,不過我們一般也不去檢測. PCR的時候可以設(shè)置梯度,分別加0.5μl,1μl,1.5μl,2μl,2.5μl,3μ...
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我想問PCR擴(kuò)增時使用的DNA模板濃度一般多大？加多少？
2個回答2022-06-22 03:16
我們一般不去特意檢測提取的得到的模板濃度，純度倒是要注意一下，紫外分光達(dá)到1.8即可，不過我們一般也不去檢測。 PCR的時候可以設(shè)置梯度，分別加0.5μl，1μl，1.5μl，2μl，2.5μl，3μ...
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PCR引物濃度一般選多少
1個回答2022-12-19 14:29
我使用的引物一般稀釋到10μM. 20微升體系每個引物加0.4微升即可。 你的50微升體系加1微升也不算多。 你降低下退火溫度試一試。
DNA電泳和濃度測量都很好，為什么PCR擴(kuò)不出來 ？用相同的體系和程序以前提取的DNA能擴(kuò)出來，為什么？
1個回答2022-09-10 14:08
那我建議你用以前的DNA作為陽性對照同時做一管，這樣才能知道除DNA模板以外，其他試劑沒有問題。這時候才要考慮是DNA模板的問題。 因為PCR反應(yīng)的條件不僅受到DNA模板的影響，還有其他因素，如： 引...
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全基因組DNA跑膠拖尾
3個回答2022-07-15 01:16
請教一下，我的也出現(xiàn)了這一問題，你后來是怎么解決的
提取的DNA模版濃度均低于50ng/ul，做25微升體系的PCR，模版應(yīng)該加多少微升？
2個回答2022-12-19 00:20
可以稍微大一點(diǎn)，加3ul試一試，不過模板這個要求不太高，關(guān)鍵是你的引物設(shè)計的質(zhì)量還有DNA聚合酶的活性，據(jù)說不是有人做過“單分子PCR”嗎？
請教一下，怎樣用DNA marker 推算出DNA濃度
3個回答2022-10-03 21:17
Marker 的說明書中，標(biāo)明了各個條帶的濃度，把樣品DNA的亮度和 Marker 對比，找出亮度比較接近的Marker 條帶，然后查看該條帶的濃度。以此可以推算樣品DNA的濃度。
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