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1995年，馬思純出演了個人的首部電影《三個人的冬天》。2000年，馬思純參演了個人的首部電視劇《大宅門》，并在劇中飾演了少年白玉婷。高一時馬思純隨媽媽蔣文娟到北京定居，從那以后便一直和媽媽住在一起。

2007年，馬思純因擔任饒雪漫小說《甜酸》的書模而被更多人所認識 。高考之前，已經(jīng)積累了一些演戲經(jīng)驗的馬思純報考了北電導(dǎo)演系，但并未成功。隨后，她聽從媽媽的建議考入了中國傳媒大學的播音系。大二的時候，馬思純被沈嚴導(dǎo)演挑中出演電視劇《爸爸我懷了你的孩子》的女一號，她他因此正式進入演藝圈發(fā)展 。2008年，馬思純主演了正式出道演藝圈的首部作品，她與郭曉冬搭檔主演了根據(jù)網(wǎng)絡(luò)小說《爸爸我懷了你的孩子》改編的都市愛情劇《戀人》，并在劇中飾演了敢愛敢恨的女主角思純 ；同年，馬思純還與檀健次、莫文蔚、蔣雯麗共同出演了電影《秘岸》。2009年，馬思純又出演了蔣雯麗執(zhí)導(dǎo)的劇情片《我們天上見》。

2011年，馬思純與胡歌、陳柏霖、陳意涵合作出演了都市時尚劇《摩登新人類》，并在劇中飾演了知性聰慧的完美小姐溫雪 。

2012年，馬思純與范植偉搭檔主演了現(xiàn)代情感電影《歲月無聲》，并在劇中飾演了女主角楊朵朵 ，馬思純也憑借此片獲得了中國電影表演藝術(shù)學會金鳳凰最佳新人獎 ；隨后，馬思純還與扎西頓珠搭檔主演了系列都市時尚單元劇j《刷新3+7》之《小城故事多》，并在劇中飾演了如丁香花般的美麗女孩小苗 。